鹅副粘病毒NA-1株主要免疫原性蛋白F基因遗传变异研究及原核表达载体的构建

摘要

本文参考GeneBank发表的相关鹅副粘病毒(GPMV)基因组核苷酸序列,设计并合成了一对特异性引物,采用RT-PCR技术对GPMVNA-1株的F基因进行扩增,将目的基因克隆到pGEM(R)-T载体后测序.经序列分析、进化树分析等一系列工作,分析了GPMVNA-1株F基因的遗传变异情况,并构建了原核表达载体.结果表明:GPMVNA-1株的F基因全长1662bp,编码553个氨基酸,与其它GPMV毒株同属基因Ⅶ型NDV;与已发表的GPMV核苷酸、氨基酸同源性分别平均为97.76％、98.0％,而与国家标准株F48E9和LaSota传统弱毒株的同源性分别为87.4％、92.2％,84.8％、89.0％,说明GPMVNA-1株F基因具有较高的遗传稳定性,但与鸡源NDV之间发生了一定的变异;结合亲水性、表面极性、抗原位点分析不同来源的NDVF基因,为研究NDV跨种间传播提供了一定的理论基础,同时为构建基因工程疫苗奠定了基础.