小鼠LIF基因分泌型真核表达载体的构建及其应用研究

摘要

目的:构建小鼠白血病抑制因子的真核表达载体,有助于提高其他实验动物的胚胎干细胞的定向分化研究. 方法:运用RT-PCR技术,克隆含信号肽和不含信号肽的小鼠分泌型白血病抑制因子,通过pMD18-Tsimple载体和pBS-T载体过渡,酶切进行初步鉴定. 结果:分别经过酶切鉴定,成功构建了小鼠LIF基因真核表达载体pSecTag-LIF(sp+)和pSecTag-LIF(sp). 结论:构建小鼠白血病抑制因子的真核表达载体有效可行,不仅为进一步研究LIF细胞因子所诱导的维持胚胎干细胞未分化状态的分子机制奠定了基础,而且为各种转基因实验动物的研究提供了一种新的方法.