新穿膜肽蛋白His-T1-GFP的跨膜效率和细胞毒性研究

摘要

目的：研究新穿膜肽蛋白His-T1-GFP对不同细胞的跨膜效率和细胞毒性。方法：采用荧光显微镜来观察His-T1-GFP和His-Tat-GFP跨膜进入不同细胞的情况;使用酶标仪检测细胞荧光强度,研究其跨膜的动力学因素,并采用细胞乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒和MTT法来评价它对不同细胞的毒性作用。结果：在一定范围内,穿膜肽His-T1-GFP能有效跨过多种细胞膜,且对NRK52E细胞的跨膜效率明显高于His-Tat-GFP。该蛋白的跨膜转运效率与蛋白自身的作用时间和浓度有关,而与温度无关,当其终浓度高达5mg/mL时,对CNE2和NRK52E两种细胞几乎没有毒性作用。结论：His-T1-GFP蛋白是一种跨膜效率高且低毒的新穿膜肽蛋白。