碱性污染土壤宏基因组文库的构建以及酶基因的克隆

摘要

极端微生物是一个巨大的潜在的优势基因资源库，未培养微生物研究是极端微生物研究的一个重要组成部分。未培养微生物在自然界土壤栖息群中占99%以上的资源。直接从极端环境土壤中抽提纯化宏基因组DNA构建文库是从分子生物学角度研究微生物基因资源的重要途径，这也是研究未培养微生物的生态、生理等特性的关键方法。本研究工作从碱性污染环境中采集土壤，直接提取纯化土壤宏基因组DNA，利用大肠杆菌作为宿主细胞构建质粒宏基因组文库。直接抽提和分离得粗制宏基因组DNA的产量为每克土壤样品10～30μg。