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PRRSV tGP5基因克隆及pcDNA3.1-tGP5真核表达载体的构建

摘要

根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因的核苷酸序列设计一对特异性引物,用PCR方法合成PRRSV S1 GP5蛋白非中和性表位缺失的tGP5基因,将基因定向连接在真核表达载体pcDNA3.1的HindⅢ和EcoR Ⅰ的多克隆位点之间,构建重组质粒pcDNA3.1-tGP5.转化DH5α感受态大肠杆菌,提取质粒.重组质粒经PCR、双酶切鉴定及DNA序列测定,成功构建pcDNA3.1-tGP5基因的重组体.

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