H9N2亚型猪流感病毒NP基因的原核可溶表达及单克隆抗体的制备

摘要

@@参照已知猪流感病毒(Swine influenza virus，SIV)核蛋白基因(Nucleoprotein，NP)核苷酸序列设计合成一对引物，经RT-PCR扩增得到目的片段约1400bp，然后克隆入pMD18-T载体中，经测序比较，与Genbank上H9N2(ACCESSION DQ064442)序列同源性达99%。从T-载体中切下目的片段后，定向克隆入pET-28a(+)中，转化RosettaTM(DE3)，经终浓度1mmol/LIPTG诱导，SDS-PAGE电泳结果显示，重组蛋白NP得到高效表达，分子质量约为55.1ku。