新型免疫抑制剂(5R)-5-羟基雷公藤内酯醇(LLDT-8)的作用机理研究

摘要

目的雷公藤(Tripterygium Wilfordii Hook.F)及其提取物长期以来在临床和民间用于治疗类风湿性关节炎、红斑狼疮、慢性肾炎等自身免疫性疾病和炎症性疾病，雷公藤内酯醇(triptolide)是迄今研究发现的雷公藤植物活性成分中最具有代表性、免疫抑制活性最强的化合物，但其生物学毒性太强，狭窄的治疗窗和强烈的毒副反应使其难以开发利用为临床用药。(5R)-5-羟基雷公藤内酯醇(LLDT-8，(5R)-5-hydroxytriptolide)是雷公藤内酯醇经过结构修饰优化后得到的全新结构新化合物，保留了免疫抑制活性，同时降低了难以逾越的雷公藤内酯醇类化合物的毒性堡垒。我们的研究证实，LLDT-8对多种自身免疫性疾病动物模型(类风湿性关节炎，多发性硬化症，免疫性肝损伤，肺纤维化等)和移植排斥反应(心肌移植，骨髓移植)具有治疗作用，并对其作用机理进行了探讨。方法LLDT-8口服给药能显著地降低Ⅱ型胶原诱导的DBA/1小鼠关节炎模型(CIA)的发病率和关节炎严重程度，该治疗作用是通过阻断T淋巴细胞活化、抑制IFN-γ信号传导途径中相关基因的激活表达，包括IFN-γ产生途径(STAT1、T-bet、IL-12Rβ32、STAT4)；IFN-γ诱导的趋化因子表达水平(Mip-1a、Mip-1β、RANTES、IP-10)以及趋化因子受体表达水平(CCR1、CCR5、CXCR3)，并通过抑制IFN-γ/STAT1/IRF-1/iNOS途径阻止了一氧化氮(NO)的异常增加，同时抑制精氨酸酶活性的异常升高。在人类多发性硬化(MS)的动物模型——实验性自身免疫脑脊髓膜炎(EAE)中，LLDT-8降低了EAE的发病率和严重程度，该作用与抑制抗原特异性的T淋巴细胞增殖和活化相关。结果 LLDT-8具有抗移植排斥作用。在小鼠同种异位心肌移植排斥反应中，LLDT-8明显延长小鼠心肌移植物的存活时间，该作用与抑制趋化因子及趋化因子受体的表达有关；LLDT-8明显延长急性移植物抗宿主病(aGVHD)模型小鼠的的存活，促进免疫重建，该作用与诱导CD4+ CD25+调节性T细胞密切相关。结论LLDT-8能够成为具有我国自主知识产权，用于治疗多种自身免疫性疾病的新型免疫抑制剂。