核心蛋白聚糖在肾小管间质损害中的作用

摘要

目的探讨Decorin对TGFFβ1诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响；观察Deeorin对TGFβ1诱导的HK-2细胞I、Ⅲ型胶原表达的影响。方法将体外培养的HK-2细胞分为6组：A．阴性对照组；B．10ng／ml TGFβ1组：C．10ne／m1Decorin组；D．100ng／ml Decorin组；E．10ng／ml TGFβ1+10ng／mlDecodn组；F．10ng／m1TGFβ1+100ng／ml Decorin组。培养48h后，倒置显微镜下观察各组细胞的形态学变化。应用逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)检测HK-2细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α—SMA)、波形蛋白、角蛋白、I、Ⅲ型胶原mRNA水平的表达；应用蛋白印迹技术(western-blot)和细胞免疫组化方法观察不同浓度的Decorin对HK-2细胞I、Ⅲ型胶原蛋白水平表达变化的影响。结果(1)A组、C组和D组细胞形态无明显变化，大部分细胞仍为椭圆形；A、C、D三组中，α-SMA、波形蛋白、角蛋白mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。B组HK-2细胞形态发生明显变化，大部分细胞拉长呈梭形，波形蛋白、α-SMA mRNA表达明显提高，角蛋白mRNA表达减少，与A组相比较有显著性差异(P<0.05)。E组和F组，梭形样细胞明显减少，尤其是F组梭形样细胞减少更明显，波形蛋白、α-SMA mRNA表达有所下降，角蛋白mRNA表达呈上升趋势，与B组相比较有显著性差异(P<0.05)，其中E组和F组两组间亦有显著性差异(P<0.05)。(2)B组与A相比较，HK-2细胞I、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白质的表达量明显增多；加入不同浓度的Decorin后，I、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白质的表达与单独TGFβ1组相比有不同程度的减少，且E组和F组相比较，两组间差异显著(P<0.05)。结论(1)TGFβ1能明显诱导人肾小管上皮细胞发生转分化；Decorin对TGFβ1诱导的人肾小管上皮细胞转分化具有抑制作用。(2)TGFβ1能促进人肾小管上皮细胞合成I、Ⅲ型胶原。(3)Decorin能抑制TGFI~1刺激引起的人肾小管上皮I、Ⅲ型胶原合成增加。