实时荧光定量PCR检测铜绿假单胞菌主动外排泵基因mRNA方法的建立及初步应用

摘要

近年来世界范围内医院监测结果表明,铜绿假单胞菌(Pa)仍然是目前难治性医院感染的主要致病菌,主要原因Pa多重耐药(MDR)株不断出现.研究证实,铜绿假单胞菌细胞膜上的主动外排泵是其产生MDR的分子学基础之一.当前对Pa主动外排泵的检测主要采用Westem-blot,但Western-blot技术复杂、实验流程多、耗时长、实验条件要求高、抗体昂贵且不易获得,故临床实验室难以开展.本文通过实时荧光定量PCR对铜绿假单胞菌MexAB-OprM外排泵进行检测，以期建立一种定量检测铜绿假单胞菌5种外排泵的表达的简便易行的方法，明确外排泵的表达在铜绿假单胞菌耐药机制中的作用，为临床开展铜绿假单胞菌感染监测服务。