结直肠癌k-ras基因突变率及相关因素的研究

摘要

背景和目的：结直肠癌是威胁人类健康的主要癌症之一。在我国，结直肠癌的发病率在消化道肿瘤中占第二位。目前，结直肠癌的发生发展机制仍未清楚，大部分学者认为结直肠癌的发生是机体内因(肿瘤的遗传易感性)和外因(饮食和环境因素)共同作用的结果。大量实验证明结直肠癌的发生与多个癌基因的激活或抑癌基因的失活有关。所以从分子水平上揭示基因变化，以阐明结直肠癌的发病机制，是结直肠癌的研究重点。其中k-ras基因突变是最常见的结直肠癌相关基因改变之一。k-ras基因突变被认为在癌变过程中起启动作用，并是一个早期事件。目前一种新型肿瘤靶向治疗药物西妥昔单抗(cetuximab)已被应用于转移性结直肠癌的一线治疗。k-ras基因有无突变与西妥昔单抗疗效明确相关。因此k-ras基因的表达状态可以作为西妥昔单抗治疗的疗效预测因子。k-ras基因成为第一个结直肠癌靶向治疗的重要分子标志物。因此明确结直肠癌患者k-ras基因的突变情况及相关因素，不管在结直肠癌发病机制的研究，还是在结直肠癌治疗上，都起着极其重要的作用。本研究目的在于检测k-ras基因在我国结直肠癌中的突变情况。探讨k-ras基因突变的特点以及与临床相关因素的关系。rn 临床材料与方法：收集该院2008年至2009年手术的结直肠癌患者切除的结直肠癌标本47例。47例结直肠癌患者中存在肝脏转移患者5例，取其肝脏转移灶标本5例。标本共52例。将52例标本在该院病理科做成石蜡包埋肿瘤组织切片。通过焦磷酸测序技术，对52例标本进行DNA测序。检测k-ras基因突变类型及突变位置。rn 结果：rn (1)k-ras基因突变情况：47例结直肠癌标本中检测出16例发生突变，突变率为34％。5例存在肝脏转移的结直肠癌肠道标本发生k-ras基因突变2例，突变率为40％，一例其肝脏转移灶标本也发生突变，另一例肝脏转移灶标本未发生突变。其余3例肠道标本及肝脏转移灶标本均未发生突变。rn 16例发生突变的k-ras基因中，15例突变位置发生在12密码子的第二碱基，另外1例发生k-ras基因突变的突变位置发生在13密码子的第二碱基。癌组织中未见61密码子的突变。rn (2)k-ras基因突变与年龄、性别、肿瘤浸润深度、肿瘤组织学类型、淋巴结转移、远处转移及Dukes分期的关系：47例结直肠癌患者中平均年龄为62岁，小于或等于62岁22例，发生突变6例，突变率27．3％;大于62岁25例，发生突变10例，突变率40．0％。两者相比无显著统计学差异。47例结直肠癌患者中男性26例，发生突变6例，突变率23．1％;女性2l例，发生突变10例，突变率47．6％。两者相比无显著统计学差异。47例标本中，肿瘤浸润深度限于粘膜层及肌层6例，发生突变l例，突变率16．7％;肿瘤浸润深度达全层41例，发生突变15例，突变率36．6％。两者相比无显著统计学差异。47例标本中，病理报告为高分化型9例，突变2例，突变率22．2％;中分化型36例，突变13例，突变率36．1％;低分化型2例，发生突变1例。突变率50％。三者相比无显著统计学差异。47例结直肠癌患者中，存在淋巴结转移19例。发生突变8例，突变率42．1％;无淋巴结转移28例，发生突变8例，突变率28．6％。两者相比无显著统计学差异。47例结直肠癌患者中。发生远处转移(肝转移)5例，发生突变2例，突变率40．0％;无远处转移42例，发生突变14例，突变率33．3％。两者相比无显著统计学差异。47例结直肠癌患者中，Dukes A期5例，均未发生突变;Dukes B期23例，发生突变8例，突变率34．8％;Dukes C期14例，发生突变6例，突变率42．9％;DukesD期5例。发生突变2例，突变率40．0％。四者相比无显著统计学差异。rn 结论：rn (1)该院结直肠癌患者k-ras基因突变率为34％，突变位置主要位于12密码子。其次为13密码子。rn (2)本研究第一次同时检测存在肝转移的结直肠癌患者的肠道肿瘤和肝脏转移灶肿瘤的k-ras基因型，提示原发肿瘤与转移灶肿瘤k-ras基因型并不相同。rn (3)结直肠癌患者k-ras基因突变与年龄、性别、肿瘤浸润深度、肿瘤组织学类型、Dukes分期、有无淋巴结转移及远处转移无关。