以海藻酸三维支架构建BMSC源性生物人工肝组织的实验研究

摘要

目的: 以骨髓间质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC)为种子细胞,以海藻酸三维支架为载体,研究两者的相容性及其构建生物人工肝组织的可能性.方法: 将大鼠BMSC接种于海藻酸三维支架上,采用倒置相差显微镜、扫描电镜分别检测BMSC的黏附、生长与增殖情况,评价两者的相容性：同时以表皮生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)、成纤维生长因子-4(FGF-4)等细胞因子混合液诱导BMSC向肝细胞分化,检测培养液内尿素氮和白蛋白含量的变化,RI-PCR检测培养细胞ALB和AFP基因的表达,糖原染色及免疫荧光法检测细胞糖原合成功能和CK-18的表达.结果: 大鼠BMSC在海藻酸三维支架上能正常地黏附、生长和增殖；于海藻酸三维支架内加入诱导液作用于BMSC后,培养液内尿素和ALB的含量逐渐上升,RT-PCR检测到培养细胞有AFP和ALB基因的表达,同时被诱导的细胞具有糖原储存的功能并表达CK-18.结论: 海藻酸三维支架与大鼠BMSC具有良好的相容性；以EGF、HGF、FGF-4等细胞因子混合液为诱导因子,能在海藻酸三维支架上成功诱导BMSC向肝细胞分化；海藻酸三维支架和BMSC可望成为肝脏组织工程理想的种子细胞和细胞载体.