EB病毒稳定感染显著促进永生化上皮细胞恶性转化潜能和进程

摘要

EB病毒(EBV)具有172kb的基因组，大多数基因的功能不清楚，EBV与包括鼻咽癌(NPC)在内的几种肿瘤高度相关，但是EBV的在致瘤中的作用机制不清楚。NPC被认为是由EBV感染的单个转化细胞发展而来。在体外建立EBV全基因组稳定潜伏感染的上皮细胞模型一直是一个难题。为了研究EBV在肿瘤发生中的活性，选用具有低转化潜力的人胚肾上皮细胞系(293)，用前已建立的感染性克隆技术建立了EBV全基因组稳定感染的细胞系(293-EBV)。对该细胞系的生长与转化特性进行了研究。结果表明，与293细胞比较，293-EBV具有显著增强的生长能力，细胞周期出现重新分布，从G1期转向S期；转化能力增强，在软琼脂中形成的集落显著增大增多，对裸鼠的致瘤性增强。Western blot结果显示，293-EBV中NF-κB和JNK2信号通路被激活。潜伏膜蛋白LMP1是EBV增强细胞生长转化作用中的重要蛋白。在移植瘤组织中观察到成熟病毒粒子的产生和释放，这为原位肿瘤发生中EBV从潜伏基因组自发进入裂解性复制提供了直接证据。肿瘤细胞丢失EBV其增强的致瘤性丧失，而EBV的保留对这种致瘤性的维持很重要。这个模型将可以用于进一步研究EBV的基因功能、抗EBV的肿瘤治疗和肿瘤发生中的EBV活性。同时，证明了EBV感染性克隆技术是相关研究的有用工具。本研究证实EBV的稳定感染对已有低转化潜力的上皮细胞具有显著地促进恶性转化特性和进程的作用，研究结果为EBV在其相关肿瘤发生的病因学中的作用提供了新的实验依据。