MAGE-1、结核杆菌HSP70与MAGE-3融合基因的构建、原核表达及分离纯化

摘要

目的：构建结核杆菌HSP70与肿瘤抗原MAGE-1、MAGE-3的融合基因，在大肠杆菌中进行表达，并进行分离纯化。rn 方法：通过PCR方法扩增MAGE-3基因片断583-945bp和MAGE-1中间片断280-573bp，依序分别插入TBHSP70基因的3’端和5’端，构建出融合基因原核表达质粒pET28a(+)-MAGE-1-HSP70-MAGB3。含有该质粒的大肠杆菌DH5a进行诱导表达和分离纯化。rn 结果：成功构建了pET28a(+)-MAGB-1-HSP70-MAGB-3原核表达质粒，含有该质粒的大肠杆菌DH5α经诱导后表达-Mτ 97000的蛋白。经过分离纯化，获得有生物活性的复性融合蛋白。rn 结论：成功获得了MAGE-1、MAGE-3与TBHSF70的融合蛋白，为其在肿瘤免疫治疗中的相关研究奠定了基础。