重组人胰岛素原的克隆表达及其在Ⅰ型糖尿病检测中的初步应用

摘要

目的：构建人胰岛素原原核表达载体，诱导表达获得重组蛋白，并验证重组人胰岛素原在Ⅰ型糖尿病胰岛素自身抗体检测中的价值。rn 方法：采用PCR逐步合成法获得目的基因，构建原核表达质粒pBVIL1/INS，转化大肠杆菌E.coliHB101，诱导表达获得纯化重组蛋白，用重组蛋白作为包被抗原，初步建立检测胰岛素自身抗体的ELISA方法。rn 结果：获得了可被Ⅰ型糖尿病患者血清识别的重组人胰岛素原。以重组人胰岛素原作为包被抗原初步建立的ELISA方法，其敏感性和特异性分别为54.5%和100%。rn 结论：重组人胰岛素原具有良好的抗原性，可作为Ⅰ型糖尿病患者辅助诊断试剂的候选抗原。