肠胃清通过调节DNA同源重组修复对奥沙利铂增敏的作用研究

摘要

目的:本研究以人结肠癌细胞裸小鼠皮下移植瘤为模型,研究肠胃清联合奥沙利铂(OXA)的抗肿瘤作用及其机制.rn 方法:采用人结肠癌细胞株HCT-116裸小鼠皮下移植瘤模型,随机分为空白组、肠胃清组、OXA组以及联合(肠胃清+OXA)组.观察各组皮下移植瘤生长情况及组织学形态,利用TUNEL检测各组细胞凋亡情况.Western Blot及单细胞凝胶电泳观察各组细胞DNA损伤程度.利用Western Blot及免疫组化观察同源重组修复蛋白ATM和RAD51的表达情况.利用实时荧光定量PCR检测RAD51 mRNA的表达情况.rn 结果:联合用药组皮下移植瘤体生长抑制最明显,且细胞凋亡指数最大.在联合使用肠胃清后,DNA双链断裂标志物γ-H2AX表达明显增多.单细胞凝胶电泳可见联合用药组皮下移植瘤细胞拖尾现象最明显,证实肠胃清联合OXA能加重DNA损伤.肠胃清联合OXA组相比OXA组能够显著下调同源重组修复蛋白的表达,实时定量PCR结果提示,联合用药组RAD51mRNA的表达较OXA组显著降低.rn 结论:肠胃清通过干扰HRR对奥沙利铂起到协同增敏的作用,其机理可能是通过下调RAD51的表达,从而减少细胞损伤的修复能力,引起肿瘤细胞的凋亡.