应用慢病毒转染hTERT基因在人卵巢腺癌SW626细胞中的表达研究

摘要

目的:观察携带人端粒酶逆转录酶基因的慢病毒表达载体转染SW626细胞(人卵巢腺癌细胞株)后hTERT基因在靶细胞中的表达.rn 方法:将携带目的基因hTERT的重组慢病毒表达载体及包装系统共转染293T细胞(人胚肾上皮细胞株),通过超速离心沉淀法浓缩病毒上清后转染SW626细胞.转染前将靶细胞分为转染组、空转组及对照组,完成转染后于显微镜下观察靶细胞中绿色荧光蛋白显色,并应用PCR检测SW626细胞中hTERT mRNA的表达.rn 结果:293T细胞经重组慢病毒与包装质粒共转染后能产生重组病毒并且能够成果的将目的基因hTERT高效地转导入靶细胞SW626细胞中并稳定表达,荧光显微镜下可直接观察到GFP;转染后的SW626细胞经检测,其内hTERT基因mRNA表达明显增强.rn 结论:重组慢病毒表达载体LV4-pGLV-EF1a-EGFP-hTERT能够高效稳定地将外源hTERT基因导入SW626细胞并使其长久表达,为卵巢肿瘤生物治疗研究奠定了科研基础.