温阳化浊通络方对系统性硬化病成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响

摘要

目的:探讨温阳化浊通络方含药血清对系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)皮肤成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响.rn 方法:将36例SSc患者按随机数字表分为中药组、西药组和中西药组,每组12例,中药组予口服温阳化浊通络方汤剂,西药组予口服青霉胺片(每次0.1259,每日2次)和强的松片(每次20mg,每日1次),中西医组予口服青霉胺、强的松及温阳化浊通络方汤剂,治疗1个月制备含药血清.另取10例未治疗的SSc患者血清作为对照组.各组血清分别加入皮肤成纤维细胞培养体系中.Western blot法测定皮肤成纤维细胞TGF-β1Ⅰ型受体(TGF-β1 RⅠ)、TGF-β1Ⅱ型受体(TGF-β1 RⅡ)、p-Smad2/3及Smad7蛋白表达RT-PCR法检测SSc皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原(COL-Ⅰ、COL-Ⅲ)mRNA的表达,ELISA法测定SSc皮肤成纤维细胞培养上清液中MMP-9及TIMP-1含量.rn 结果:与对照组比较,西药组、中药组和中西药组SSc患者和健康人皮肤成纤维细胞TGF-β1 RⅠ、p-Smad2/3蛋白水平降低, Smad7蛋白水平升高(P＜0.05,P＜0.01),同时中西药组还降低TGF-β1 RⅡ蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01);与西药组比较,中药组、中西药组TGF-β1 RⅠ、p-Smad2/3表达降低,中西药组Smad7表达升高(P＜0.01).在SSc皮肤成纤维细胞中,西药组、中药组和中西药组COL-Ⅰ、COL-Ⅲ mRNA表达水平低于对照组(P＜0.05,P＜0.01),且中西药组COL-Ⅲ表达水平明显低于西药组(P＜0.01).同时与对照组比较,西医药、中药组、中西药组MMP-9水平及MMP-9/TIMp-1比值明显升高(P＜0.05,P＜0.01),而中药组、中西药组TIMP-1表达水平降低(P＜0.01);与西药组比较,中西药组MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1比值升高,TIMP-1水平降低(P＜0.05,P＜0.01).rn 结论:温阳化浊通络方含药血清可能通过调控SSc皮肤成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路中关键分子——TGF-β1 RⅠ、p-Smad2/3、Smad7的表达,抑制TGF-β1/Smad信号通路传导,减少Ⅰ、Ⅲ型胶原表达.