江苏1例猪增生性肠炎的PCR鉴定和16S rRNA序列的克隆分析

摘要

根据GenBank公布的引起猪增生性肠炎的胞内劳森氏菌的16S rRNA基因的序列，设计并合成一对特异性引物。应用建立的PCR方法从江苏地区疑似患有猪增生性肠炎病猪的8份血便样品中，鉴定出3份样品中存在胞内劳森氏菌。随机选取1份胞内劳森氏菌，命名为江苏株(JSAV-1株)。将其16S rRNA基因克隆到pMD-18 T载体上并进行测序鉴定。应用DNAstar序列分析软件对分离株的16S rRNA基因和其推导氨基酸序列与GenBank中的公布的胞内劳森氏菌的16S rRNA进行序列比对，确定JSAR-1株与GenBank上已公布的胞内劳森氏菌序列同源性为98.9％。结果表明本PCR方法特异性好，为实验室鉴定胞内劳森氏菌提供了一种简单、容易操作的手段。