脂联素基因突变-11377C/G检测方法建立及与2型糖尿病关系的研究

摘要

目的：建立脂联素基因(aPM1)-11377C/G点突变的检测方法,探讨aPM1-11377C/G点突变单核苷酸多态性(SNP)与血清脂联素(APN)水平及2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法：构建含aPM1-11377C/G点突变的野生型和突变型质粒标准品,采用等位基因特异性PCR(ARMS-PCR)方法，结合荧光探针(TaqMan Prob),通过对引物3'端正配与错配扩增效率差别的比较,建立ARMS—TaqMan检测aPM1-11377C/G点突变的方法.同时,分别对156例(男87/女69)糖尿病患者(T2DM组)和89例(男21/女68)健康对照者(NC组)的aPM1-11377C/C基因频率,以及APN、各种生化指标以及临床基本资料进行检测和调查。结果：T2DM组APN水平显著低于NC组(7.83±4.55 mg/Lvs.9.57±5.97mg/L,P<0.05).aPM1-11377位点CC、CG、GG基因的APN水平呈趋势性降低(9.72±5.52 mg/L,6.86±4.00mg/L,4.29±2.18mg/L,P<0.001).T2Dm组与对照组间的aPM1-11377位点cc、CG、GG基因频率差异有显著性(P<0.05).T2DM组的aPM1-11377 G等位基因频率显著高于NC组(24.36%vs.19.11%,P>0.05)。结论:ARMS-TaqMan方法检测aPM1-11377C/G基因点突变具有准确、经济和适合高通量检测的特点.aPM1-11377C/G多态性与血清脂联素水平和T2DM相关。