人颈椎间盘组织的细胞培养及形态特征观察

摘要

目的：采用组织块细胞培养法进行脊髓型颈椎病及青少年颈椎外伤患者手术摘除的椎间盘组织进行细胞培养、传代及形态学特征观察。方法:取6例确诊为脊髓型颈椎病患者和3例青少年颈椎外伤患者行颈椎减压融合手术摘除的椎间盘组织，采用组织块法培养原代细胞，以20%FBS的DMEM为培养基;用4%的多聚甲醛固定细胞15min，进行HE、甲苯胺蓝、阿力新蓝、Ⅰ型胶原免疫荧光、Ⅱ型胶原免疫荧光、X型胶原免疫荧光染色观察。结论:通过组织块细胞培养法可获得一定数量的正常椎间盘细胞和退变椎间盘细胞，可成功地进行传代及形态特征观察;退变椎间盘细胞较正常椎间盘细胞生长及增值缓慢;脊髓型颈椎病患者退变椎间盘细胞传代后第二代时出现明显的分化和衰老现象;退变椎间盘细胞较正常椎间盘细胞Ⅱ型胶原免疫荧光表达明显降低，而Ⅰ型胶原和X型胶原免疫荧光表达均明显增高。