高表达野生型和突变型SOD2耳蜗毛细胞模型的构建

摘要

锰超氧化物歧化酶(Manganese SuperoxideDismutase,SOD2)主要分布于线粒体基质内，是线粒体内唯一能将超氧阴离子(O2-)催化为过氧化氢(H2O2)的酶，是机体清除ROS的第—道防线。编码SOD2信号肽的基因序列第16位密码子有GCT(丙氨酸，Ala)和GTT(颉氨酸，Val)的互换，即C47T变异(dbSNP数据库收录号：rs4880)。该位点变异位于编码区且表达后可能会对SOD2蛋白的靶向定位产生重要影响，目前关于SOD2 SNP的研究有一半左右集中在该位点。为了深入了解SOD2高水平的表达及其C47T变异对耳蜗毛细胞氧化损伤的影响，拟构建SOD2 rs4480A1a16型（突变型）和Val16型（野生型）全长ORF表达克隆，并通过脂质法对HEI-OC1细胞进行转染，建立野生型和突变型SOD2耳蜗毛细胞模型。