矽尘暴露人群血清相关蛋白质的研究

摘要

目的：筛选矽尘暴露人群诊断相关血清差异蛋白并对鉴定出的蛋白进行初步的功能验证。方法：应用液体芯片飞行时间质谱技术检测I 期矽肺组25 例，非暴露正常对照组、矽尘暴露组及可疑矽肺组每组30 例，共115 例样本的血清蛋白质指纹,筛选出差异较显著的蛋白,进行二级质谱鉴定其氨基酸序列,确定蛋白质身份后,对其功能进行初步验证。结果四组间共筛选出5081Da、5066Da、3954Da、2021Da ，1777Da 5 个差异蛋白质，选取其中的 2021Da 和1777Da 两个蛋白进行二级质谱鉴定，证明是补体C3 片段的C3f。然后人工合成 C3f，用不同浓度的C3f 刺激矽肺模型细胞人胚肺成纤维细胞（MRC-5）。结果：发现随着C3f 浓度的增加，MRC-5 细胞上清液中Ⅰ，Ⅲ型胶原和TGF-β1的表达量均呈进行性降低，与对照组相比，各浓度点均有显著差异（P<0.05）；同时MRC-5 胞质中TGF-β1的表达量也呈进行性降低，各浓度点差异显著（P<0.05）。结论 : 运用液体飞行时间质谱技术的一级质谱技术共筛选出5081Da、5066Da、3954Da、2021Da、1777Da 5 个差异蛋白质,然后应用二级质谱技术对1777Da 和2021Da 进行氨基酸序列鉴定发现同为C3f，后续的细胞功能研究证明C3f 能够减少MRC-5 细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1的形成。