益生性肠球菌的筛选和鉴定

摘要

本研究采集猪的肛门直肠内容物,从120份直肠样品中分离到22株细菌,初步鉴定为肠球菌属.22株肠球菌发酵液对指示菌均有抑菌活性,其中TC1、TC3、TC9、HB6、TC12、TC13等6株肠球菌的抑菌效果最明显.通过生化试验、16S rRNA扩增和种特异性片段dd1E.faecalis、dd1E.faeciu(m)扩增,确证了TC3为屎肠球菌,HB6、TC12、TC13为粪肠球菌.另外对该4株肠球菌进行了安全性评价,即毒力因子和抗生素抗性的检测。毒力因子的检测包括cylA、gelE、esp、agg、ace、efaAfs、efaA(tm)等基因片段的PCR扩增.结果显示:屎肠球菌TC3仅对青霉素、红霉素表现耐药，对环丙沙星表现中度敏感，对氨节西林、万古霉素、四环素、诺氟沙星、吠喃妥因、氯霉素均表现敏感，表明筛选的屎肠球菌TC3是安全的，65℃温度5min，细菌数量不下降，其可能是一株极好的动物肠道益生菌，为开发成动物微生态制剂奠定了坚实的物质基础。