T24细胞

摘要： 目的应用特殊培养方法从人膀胱癌T24细胞中分离培养肿瘤干细胞样细胞(CSLC),鉴定其生物学特性。方法通过应用matrigel胶与无血清培养基混合培养小数量的T24细胞,使其独立悬浮生长,由于无血清培养基及matrigel胶限制细胞活动,细胞无法贴壁和聚集,大部分细胞死亡,从而获得含CSLC的悬浮细胞球,PCR技术检测该细胞中干细胞标志物的表达,通过裸鼠皮下接种观察其成瘤能力。结果成功地从人膀胱癌T24细胞中分离培养获得可悬浮生长、稳定传代的CSLC,相对于原始T24细胞,CSLC高表达CD133、CD44、CD47、OCT4、NANOG,其成瘤能力强于原始T24细胞。结论采用无血清悬浮培养法成功从人膀胱癌T24细胞中分离获得CSLC,具有肿瘤干细胞特性。

摘要： 目的:探讨lincRNA AC099850.3在非肌层浸润性尿路上皮癌(NMIBC)中的表达和调控。方法:生物信息学筛选癌症基因组图谱(TCGA)数据库中差异性lncRNA。收集24例NMIBC手术中的正常组织和癌组织,体外培养人膀胱癌细胞系T24细胞,采用lincRNA AC099850.3的siRNA转染T24细胞,RT-qPCR测定基因表达情况。结果:生物信息学分析表达差异后得到156个上调lncRNA和69个下调lncRNA,其中61.78%为lincRNA,26.67%为反义lncRNA,11.56%为其他lncRNA。lincRNA AC099850.3上调最为显著,lincRNA AC099850.3高表达与不良预后显著相关(P=0.006)。与正常组织相比,癌组织中lincRNA AC099850.3表达明显升高(P<0.0001)。与lincRNA AC099850.3连接密切的2个miRNAs为miR-101-3p和miR-766-3p。功能富集分析显示,调控模块中的mRNA(FZD3、FZD6、COL4A1、LEF1和TCF7)可能对NMIBC的细胞周期至关重要。相对于正常组织,癌组织中miR-101-3p低表达,FZD3、FZD6、COL4A1和LEF1均高表达(P<0.05),lincRNA AC099850.3和miR-101-3p表达呈负相关(r=-0.662,P=0.001)。T24细胞转染siRNA干扰lincRNA AC099850.3后,相对于对照组和空载体组,T24细胞中lincRNA AC099850.3表达降低(P=0.002),miR-101-3p表达升高(P<0.0001),COL4A1表达降低(P=0.021)。结论:在NMIBC中,lincRNA AC099850.3高表达,可能是通过负性调控miR-101-3p促进肿瘤发展。

摘要： 目的 观察YM155对人膀胱癌细胞体外增殖作用的影响,评估其诱导人膀胱癌细胞凋亡的作用。方法 分别单用不同浓度的YM155处理T24细胞不同时间后应用MTT法测定各组T24细胞生存率;采用RT-PCR和Western印迹检测经不同浓度YM155处理后T24细胞中生存素(Survivin)mRNA和Survivin蛋白含量,流式细胞仪测定YM155对膀胱癌细胞的细胞凋亡率和细胞周期。结果 经YM155处理后,T24细胞生长明显受到抑制,抑制率可达84.58%,细胞体积和形态发生改变,细胞膜逐渐脱落,可见细胞膜起泡、凋亡小体等。对经YM155处理48 h后的T24细胞进行Survivin mRNA、Survivin蛋白、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Cleaved caspase)-3蛋白水平测定,发现随着药物浓度的上升,survivin mRNA和Survivin蛋白含量不断下降,Cleaved caspase-3含量则呈逐渐升高趋势。结论 YM155可显著抑制膀胱癌细胞的生长,最佳作用浓度范围为5~100 nmol/L,该作用呈浓度依赖性和时间依赖性,其作用机制可能为YM155抑制凋亡抑制因子Survivin的表达而诱导肿瘤细胞凋亡。

摘要： 目的 探讨miR-4258在膀胱癌T24细胞分化和侵袭过程中的作用机制.方法 通过TargetScan和荧光素酶报告基因验证miR-4248靶基因.将T24细胞分为正常对照NG组、阴性对照miR-ctrl组、miR-4258 inhibitor组和miR-4258 mimics组,采用脂质体(Lipo 2000)细胞转染法转染;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time qPCR)检测组织和细胞的miR-4258表达水平;运用免疫印迹(Western blot)检测Cadherin-19(CDH19)、E-cadherin、α-SMA的表达水平.通过Transwell检测侵袭能力的变化,明胶酶谱法测定基质金属蛋白酶2(MMP2)的活性.结果 miR-4258在膀胱上皮癌组织中的表达水平明显高于其癌旁组织,差异有统计学意义(t=3.711,P<0.01);生物信息学预测和荧光素酶报告基因验证miR-4258作用靶点为CDH193'UTR.miR-4258 mimics转染T24细胞后,CDH19和上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白表达水平较miR-ctrl组显著下调(P<0.05),而α-SMA的表达水平较miR-ctrl组显著提高(P<0.01);上调miR-4258表达MMP2的活性较miR-ctrl组显著提高(P<0.01),同时T24细胞的侵袭能力也得以明显增强.结论 miR-4258调控靶点为CDH19,可能通过下调CDH19的表达水平,促进了T24细胞分化,增强了T24的迁移和侵袭能力.

摘要： 探讨小檗碱在膀胱癌T24细胞增殖、迁移过程中的影响与其分子机制.Western blot检测受试对象的癌组织、癌旁组织中VEGFA、VEGF-R2、PI3K、Akt、p-Akt蛋白水平,CCK-8及Transwell法依次检测小檗碱对T24细胞增殖、迁移的影响;Western blot及RT-PCR法分别检测T24细胞中VEGFA、VEGF-R2、PI3K、Akt、p-Akt的蛋白及基因水平.VEGF-R2、PI3K、Akt、p-Akt蛋白水平在膀胱癌患者的癌组织中显著升高;小檗碱能够有效抑制T24细胞的增殖、迁移,同时可以显著降低T24细胞中VEGFA、VEGF-R2、PI3K、Akt的表达.小檗碱能够抑制膀胱癌T24细胞的增殖、迁移活动,同时抑制VEGF/PI3K/Akt信号通路.

摘要： 为开发新型钌(Ru)抗肿瘤药物,以3-甲基-2-噻吩甲醛-4-羟基苯甲酰肼席夫碱配体(L)合成了[Ru(L)(DMSO)2Cl2](1)(DMSO=二甲基亚砜).用X射线单晶衍射法测定了1的晶体结构.配合物1的结构由1个Ru(Ⅱ)中心离子与2个DMSO分子、2个氯离子、1个L配位而成.通过MTT实验分析,1对T24细胞表现出良好的抗肿瘤活性.同时,通过彗星实验、蛋白质印迹实验和DNA琼脂糖凝胶电泳实验结果证明1可以有效结合DNA,诱导DNA损伤,最终杀死肿瘤细胞.导致DNA损伤的原因很可能是由于细胞与1孵育后细胞内可以产生大量的活性氧.

摘要： 目的 研究苏木素诱导膀胱癌T24细胞凋亡的机制.方法 将0.05％,0.1％和0.2％不同浓度的苏木素加入T24细胞培养基中培养,MTT法绘制肿瘤细胞生长曲线.0.2％苏木素处理24 h后,透射电镜观察肿瘤细胞超微结构改变,RT-PCR检测癌细胞细胞色素C、caspase-3和caspase-9表达水平,癌细胞线粒体DNA的两个高变区HV1和HV2的变异程度.结果 苏木素对肿瘤细胞的诱导凋亡作用随苏木素浓度的增加而增强.0.2％苏木素处理24 h后,超微结构发生改变,细胞形态不规则,细胞核深染,染色质呈块状凝集,胞浆内出现空洞,线粒体较少,部分细胞器破坏,细胞膜有缺损现象;0.2％苏木素处理24 h后,线粒体DNA的两个高变区HV1和HV2位点均未发生突变.与空白对照比较,0.2％苏木素处理24 h后,肿瘤细胞中细胞色素C的表达水平提高了1.16倍,caspase-3的表达水平提高了3.23倍,caspase-9的表达水平提高了7.94倍.结论 随着苏木素浓度的提高,其诱导膀胱癌细胞凋亡的能力增强,其并未通过导致线粒体DNA发生突变而启动凋亡,而是通过使线粒体中的细胞色素C释放到细胞质中,引发caspases级联反应,导致T24细胞凋亡.

摘要： 目的 研究澳洲茄碱对膀胱癌细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期的影响及其作用机制.方法 0、5、10、20、40μmol/L澳洲茄碱处理膀胱癌J82和T24细胞24 h、48 h、72 h后,应用CCK-8检测细胞生存率.0、10、30μmol/L澳洲茄碱处理J82细胞24 h后,用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期.0、10、30μmol/L澳洲茄碱处理J82细胞24 h后,应用Western blot法检测mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K蛋白的表达.0、10、20、30μmol/L澳洲茄碱处理J82细胞24 h后,RT-qPCR法检测mTOR、p70S6K mRNA表达情况.结果 澳洲茄碱显著抑制膀胱癌J82细胞、T24细胞增殖,相同作用时间、不同浓度组细胞生存率总体差异均有统计学意义(P<0.01).澳洲茄碱诱导J82细胞凋亡,0、10、30μmol/L澳洲茄碱组凋亡率分别为(0.93±0.26)％、(8.33±2.16)％、(29.53±7.63)％.澳洲茄碱引起J82细胞发生S期阻滞,0、10、30μmol/L澳洲茄碱组S期细胞占比分别是(34.51±3.61)％、(39.34±3.21)％、(44.50±4.29)％.澳洲茄碱下调J82细胞p-mTOR蛋白表达(F=85.18,P<0.01)和p-p70S6K蛋白表达(F=74.96,P<0.01).澳洲茄碱下调J82细胞mTOR mRNA表达(F=31.49,P<0.01)和p70S6K mRNA表达(F=47.08,P<0.01).结论 澳洲茄碱通过mTOR信号通路抑制膀胱癌细胞增殖、促进细胞凋亡、阻滞细胞周期.

摘要： 目的:研究在膀胱癌化疗中使用姜黄素的增敏功能原理。方法:在T24细胞经过姜黄素及放射处理后,探讨分析其细胞活力(细胞增殖试验试剂盒)、microRNA表达(miRNA芯片测序)、集落形成、凋亡(AnnexinV-F)分析、miR-1246及p53 mRNA及蛋白质(Westernblot)表达、ITC/7-AAD流式细胞计数(ITC/7-AAD)。结果:通过测试,发现17个异常microRNA表达,细胞在经过姜黄素处理后,T24细胞活力相较于常规组明显下降,并出现浓度依赖性的现象。在T24细胞中,miR-1246相较于人膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1细胞)表达明显较高。姜黄素的浓度较高时,T24细胞miR-1246的表达会受其影响并明显下降。研究组使用浓度为20μg/mL的姜黄素,并结合放疗处理的方式,与常规组相比,研究组在控制miR-1246的表达、集落形成及细胞活力方面,效果更为显著,T24细胞比例会因转染antagomiR-1246而增加,细胞死亡现象一般发生于转染antagomiR-NC细胞时期。结论:膀胱癌细胞中,姜黄素和放射治疗都可促进microRNA-1246表达下调,在对肿瘤的治疗中可以使姜黄素及放疗结合,共同产生抗肿瘤作用。

摘要： 目的 探讨Akt抑制剂MK2206对膀胱癌细胞(T24)增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 采用CCK-8法检测不同时间、不同浓度(0,1,5,10,20μmol?L-1)MK2206对T24细胞增殖的影响,流式细胞术检测不同浓度MK2206对T24细胞凋亡的影响;Western blotting检测Akt磷酸化蛋白表达情况及GSK-3β/β-catenin通路蛋白的表达水平.结果 CCK-8法检测显示,MK2206对T24细胞增殖活力具有显著的抑制效果(P<0.05),且在0～20μmol?L-1内呈浓度-时间依赖性.流式细胞术检测结果表明,MK2206在作用T24细胞24 h后,能够促进T24细胞凋亡.Western blotting检测显示,p-Akt(ser347)蛋白表达量显著降低(P<0.01);同时,MK2206在对GSK-3β总蛋白表达无明显的影响,P-GSK-3β、β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.05).结论 MK2206能够抑制T24细胞增殖,促进其发生凋亡,从而缓解膀胱癌发展进程,其作用机制可能是抑制GSK-3β/β-catenin信号通路.

摘要： 本发明公开了一种苯并二四氢吡咯类化合物或其药学上可接受的盐、及其制备方法和应用。本发明的苯并二四氢吡咯类化合物具有式I所示的结构，经体外和体内实验验证，对DPP‑Ⅳ具有非常好的选择性抑制作用，在有效抑制DPP‑Ⅳ活性的同时，对DPP‑VIII和DPP‑IX的活性几乎没有影响，同时钾离子通道抑制率较低，可预见本发明化合物开发成药后毒性会比较低。本发明的苯并二四氢吡咯类化合物与上市的每周口服一次药物奥格列汀相比有相当或有更高的生物利用效率，可预见本发明化合物开发后有望达到较长时间口服一次的治疗效果，大大提高患者的便利性和依从性。并且制备方法简单，原料易得，适合工业化大规模生产。

摘要： 本发明公开了一种简单的制备得到具有同质多晶现象的二四苯乙烯亚砜和二四苯乙烯基砜荧光化合物的方法。以易于合成的二苯硼酸酯硫醚和三苯基溴基乙烯为原料，反应得到二四苯乙烯基硫醚化合物，然后通过控制氧化剂的用量分别得到二四苯乙烯基亚砜和二四苯乙烯基砜两种荧光化合物。通过在不同的溶剂中重结晶以及不同温度下加热，二四苯乙烯基亚砜和二四苯乙烯基砜可以获得两种及以上堆积模式晶体，每种晶体的荧光颜色不同，都具有研磨性能。本发明有利于研究晶体不同堆积模式和性能之间的关系。本发明具有反应条件温和、操作简单、合成效率高等优点。

摘要： 本发明提供了一种二四冲程发动机可变气门系统，包括凸轮轴、第一凸轮、第二凸轮、液压缸、气门和凸轮相位调节机构；第一凸轮与第二凸轮并列套于凸轮轴，且至少有一个为活动凸轮；液压缸顶部并列设有第一液压腔和第二液压腔，第一液压腔和第二液压腔的内部分别设有可上下滑动第一柱塞和第二柱塞；气门顶端与活塞固定连接，活塞可沿液压缸内壁间隙滑动；通过控制凸轮相位调节机构，可以使第一凸轮与第二凸轮至少实现凸轮相位部分重叠以及凸轮相位沿凸轮轴轴心对称分布两种状态，最终实现2/4冲程可变。本发明不需要在每一个工作循环下都对控制机构进行操作，而是在冲程需要改变的工况下才进行调整，控制简单，有利于可变气门技术的工程化应用。

摘要： 本发明提供了一种二四冲程可变发动机气门机构，包括四冲程凸轮、二冲程凸轮，四冲程凸轮和二冲程凸轮位于同一根凸轮轴上，且四冲程液压缸由四冲程凸轮驱动，二冲程液压缸由二冲程凸轮驱动，所述四冲程液压缸、二冲程液压缸分别通过气缸盖内部各自的油道连接至滑动腔；滑动腔一端通过气缸盖中的油道连接至执行液压缸；所述滑动腔内设有滑动阀芯，电磁阀控制滑动阀芯在滑动腔内的轴向位移，当滑动阀芯为伸出状态时，四冲程运转；当滑动阀芯为收回状态时，二冲程运转；执行液压缸用于控制气门运动。本发明所述的二四冲程可变发动机气门机构，通过电磁阀控制滑动阀芯位置的改变和液压油路的切换，实现四冲程或二冲程的高速在线切换。

摘要： 本发明提供了用于气阀式二四冲程可变换高功率柴油机的活塞燃烧室，尤其涉及发动机领域。包括：中心平台a、圆锥面b、圆弧c、直线段d、直线段f、圆弧e、燃烧室侧壁及梅花瓣结构，燃烧室侧壁顶部开设有梅花瓣结构，中心平台a的高度与原燃烧室相同，局部梅花式燃烧室的压缩比与原燃烧室相同，与圆锥面b连接的圆弧c形状和尺寸与原燃烧室相同。在二、四冲程变换柴油机上兼顾二冲程和四冲程两种模式，保证四冲程模式下原有的低油耗和低排放特性的同时又在不改变活塞材料的基础上缓解了二冲程模式下活塞高热负荷问题。

摘要： 考虑开路下二四次转矩波动的五相永磁电机容错电流计算方法，属于多相永磁电机领域，本发明为改善反电势包含三、五次谐波的五相永磁电机在开路故障下的转矩性能，使电机具备开路故障下平稳运行的能力。本发明方法在发生开路故障时仅调整非开路相电流相位，抑制故障后转矩中和反电势基波、三次谐波和五次谐波相关的2、4次转矩波动成分，以维持低转矩波动特性，进而实现平稳容错运行。开路故障分为一相绕组开路故障和逆变器开关管开路故障两种类型，限定条件为不约束零序电流，本发明在保证电机转矩输出能力的前提下，有效的降低了五相电机发生一相绕组开路故障和逆变器开关管开路故障时容错运行的转矩波动。

摘要： 本发明公开了一种简单的制备得到具有同质多晶现象的二四苯乙烯亚砜和二四苯乙烯基砜荧光化合物的方法。以易于合成的二苯硼酸酯硫醚和三苯基溴基乙烯为原料，反应得到二四苯乙烯基硫醚化合物，然后通过控制氧化剂的用量分别得到二四苯乙烯基亚砜和二四苯乙烯基砜两种荧光化合物。通过在不同的溶剂中重结晶以及不同温度下加热，二四苯乙烯基亚砜和二四苯乙烯基砜可以获得两种及以上堆积模式晶体，每种晶体的荧光颜色不同，都具有研磨性能。本发明有利于研究晶体不同堆积模式和性能之间的关系。本发明具有反应条件温和、操作简单、合成效率高等优点。

摘要： 本实用新型公开了一种自动双离合变速箱二四档同步器组件，包括齿套与齿毂，齿套固定连接有多组第一齿轮，齿毂连接有与多组第一齿轮相适配的第二齿轮，齿套与齿毂之间开设有三个卡口组合，三个卡口组合内部分别设置有一个滑块，齿毂开设有两个放置槽，三个滑块连接有两个钢丝簧；通过将三个滑块分别卡接在位于三组第一齿轮开设的三个卡口组合内部，然后将齿套连接的三组第一齿轮分别与齿毂连接的三组第二齿轮啮合相连，然后将两个钢丝簧分别放置在两个放置槽内部，且两个钢丝簧在圆周方向走向相反，两个钢丝簧卡爪卡在不同的滑块内，然后将齿套与变速箱相连接，有效解决工作过程中齿套与齿毂在变速箱里来回滑动的问题。

摘要： 本实用新型公开了一种管材生产用正十字二四爪牵引机，包括牵引机主体，牵引机主体的底部固定安装有四个固定架，固定架上转动安装有支撑脚，牵引机主体的两侧内壁上均沿圆周固定安装有四个限位导轨，四个垂直设置的限位导轨内均滑动安装有滑动连接块，两个相对应的滑动连接块之间固定安装有垂直限位固定框，四个水平设置的限位导轨内均滑动安装有传动滑块，本实用新型中通过将传统的斜45度排布的四条履带改为正十字排布，从而使工作范围大大提高，并且可在做小管时避免管材从履带间落下，通过设有的伸缩气缸、驱动电机、传动滑块和滑动连接块等结构的相互配合，从而可对四个履带分别控制，可在使用中根据制品规格所需要的压力进行调节压紧力。

摘要： 本实用新型提供一种反式二四癸二烯醛高效生产装置。所述反式二四癸二烯醛高效生产装置，包括：底座；固定架，所述固定架固定连接于所述底座的顶部，所述固定架的两侧之间转动连接有加工转筒。本实用新型提供一种反式二四癸二烯醛高效生产装置，通过设置升降结构，可以调节底座的离地高度，当装置所处环境中水位不断升高时，可以通过启动转动电机，最终使得支撑件可以稳定的向下延伸，进而使得底座不断被抬起，直至支撑件延伸至最大高度，此时整个装置被抬高，进而避免水直接进入装置内部，使得装置内部结构受潮而出现损坏，在不便于快速转运装置时，只需要通过启动转动电机即可，使得装置暂时处于安装状态，对装置起到很好的防水保护作用。