MiR-4258靶向调控CDH19对膀胱癌T24细胞分化和侵袭能力的影响

摘要

目的 探讨miR-4258在膀胱癌T24细胞分化和侵袭过程中的作用机制.方法 通过TargetScan和荧光素酶报告基因验证miR-4248靶基因.将T24细胞分为正常对照NG组、阴性对照miR-ctrl组、miR-4258 inhibitor组和miR-4258 mimics组,采用脂质体(Lipo 2000)细胞转染法转染;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time qPCR)检测组织和细胞的miR-4258表达水平;运用免疫印迹(Western blot)检测Cadherin-19(CDH19)、E-cadherin、α-SMA的表达水平.通过Transwell检测侵袭能力的变化,明胶酶谱法测定基质金属蛋白酶2(MMP2)的活性.结果 miR-4258在膀胱上皮癌组织中的表达水平明显高于其癌旁组织,差异有统计学意义(t=3.711,P<0.01);生物信息学预测和荧光素酶报告基因验证miR-4258作用靶点为CDH193'UTR.miR-4258 mimics转染T24细胞后,CDH19和上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)的蛋白表达水平较miR-ctrl组显著下调(P<0.05),而α-SMA的表达水平较miR-ctrl组显著提高(P<0.01);上调miR-4258表达MMP2的活性较miR-ctrl组显著提高(P<0.01),同时T24细胞的侵袭能力也得以明显增强.结论 miR-4258调控靶点为CDH19,可能通过下调CDH19的表达水平,促进了T24细胞分化,增强了T24的迁移和侵袭能力.