基于DNA随机改组技术的扩增内标制备方法

摘要

一种生物技术领域的基于DNA随机改组技术的扩增内标制备方法，步骤包括：根据目的基因设计得到特异性检测引物和TaqMan探针；根据目标片断上的探针结合部位的DNA序列，采用DNA随机改组软件随机生成改组序列，将生成的改组序列分别替代目标片断上的探针结合部位的DNA序列，产生相应的待筛选的扩增内标序列；利用荧光探针设计软件和BLAST-N软件比对筛选扩增内标序列，得到软件评价分值最高且与其它致病微生物基因组序列非同源的序列，以此序列作为扩增内标序列；将步骤三得到的扩增内标序列克隆到载体上，构建含扩增内标序列的载体；检测得到的扩增内标序列。本发明有助于检测时显示抑制现象的存在，提高检测结果的准确率。