猪肺炎支原体P36基因重组毕赤酵母及表达蛋白

摘要

本发明公开了一种猪肺炎支原体P36基因重组毕赤酵母及表达蛋白，涉及生物蛋白制备领域。设计引物PCR获得P36目的基因后克隆入pPICZα-A表达载体，重组表达质粒pPICZα-A/P36转化感受态毕赤酵母(Pichia pastoris)X-33，筛选到重组毕赤酵母X-33/pPICZα-A/P36。表达蛋白制备方法为，将阳性酵母菌接种到BMGY中，经甲醇诱导表达，表达蛋白以可溶形式存在上清液中。该方法制备的猪肺炎支原体P36蛋白较纯，且具有良好的免疫反应性，表达蛋白可用于P36蛋白的研究、猪肺炎支原体免疫检测试剂盒和基因工程疫苗的研制。