猪肺炎支原体P97R1基因重组毕赤酵母及表达蛋白

摘要

本发明公开了一种猪肺炎支原体P97R1基因重组毕赤酵母及表达蛋白，涉及生物蛋白制备领域。主要经基因的获得、表达载体的构建、目的蛋白的表达。利用PCR方法用设计的引物从猪肺炎支原体基因组DNA中扩增获得目的基因，再经酶切和连接克隆入酵母表达载体pPICZα-A，构建成分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A/P97R1，pPICZα-A/P97R1经Sac I酶切线性化后电转化入毕赤酵母菌株GS115。重组的毕赤酵母经甲醇诱导分泌表达P97R1蛋白。该方法制备的猪肺炎支原体P97R1蛋白较纯，且具有良好的免疫反应性，可用于猪肺炎支原体P97蛋白的研究、猪肺炎支原体免疫检测试剂盒和基因工程疫苗的研制。