经修饰的猪α-干扰素基因、表达载体的构建及其蛋白的制备方法

摘要

本发明公开了一种经修饰的猪α-干扰素基因、表达载体的构建及其蛋白的制备方法。经修饰后的猪α-干扰素基因序列表如SEQ IDNO：1所示，本发明同时公开了其蛋白的制备方法，具体涉及猪α-干扰素密码子的改造、基因的克隆及在毕赤酵母中高效表达等步骤，尤其是关于猪α-干扰素密码子对酵母密码子偏嗜性的匹配、改造、高效生产猪α-干扰素的培养方法、避免污染的措施、确定加甲醇的量以及时间、对蛋白表达时间的控制即蛋白收获时间、无菌检验、蛋白含量以及活性测定、扩大培养条件等操作方法的改进。本发明方法简单易行，成本较低，实现了猪α-干扰素在毕赤酵母中得到稳定高效的表达，使干扰素的抗病毒活性提高了300倍。