本发明公开了一种腈水合活性专一性提高的腈水解酶突变体及其应用,所述突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第87位、第136位、第224位、第226位进行单突变或多突变获得的。本发明构建的突变体R224S/V226R/I136Q/A87M催化苯乙腈时,反应主产物为苯乙酰胺,酰胺的含量达到91.2%,腈水合活力为OsNIT的113.3%。野生型腈水解酶OsNIT催化苯乙腈时,苯乙酰胺含量为50.6%,同时将OsNIT腈水合活力记为100%。R224S/V226R/I136Q/A87M酰胺含量和水合活力分别为野生型的1.53倍和1.13倍。对腈水解酶的反应专一性调控使其能够应用于酰胺绿色工业催化合成,具有重要意义。
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