一种CRISPR分型PCR的方法及其应用

摘要

本发明公开了一种CRISPR分型PCR的方法及其应用，该方法为一种进行DNA检测和分型的方法。本方法将Cas9蛋白及靶向目标DNA的sgRNA加入常规PCR反应体系，在PCR反应程序前加入一个短时间恒温孵育程序，之后启动常规PCR扩增程序。本发明公开了的CRISPR分型PCR的方法是一种均相检测技术，即只需一个PCR扩增步骤即可完成检测，本发明利用了CRISPR技术对DNA的特异性识别切割特性，可以简单、均相、快速、灵敏地对目标DNA进行特异性检测和分型，是一种具有高特异性和灵敏度的DNA检测新方法，通过运用本发明的方法成功检测临床样品中人HPV DNA。