小反刍兽疫病毒H蛋白抗体iELISA检测方法及应用

摘要

本发明以筛选的小反刍兽疫病毒(Peste Des Petits Ruminants Virus,PPRV)H蛋白B细胞表位为基础，选择其中反应原性较好的4个抗原表位肽串联后合成作为包被抗原，建立针对PPRV H蛋白抗体的iELISA方法，多表位抗原肽的最佳包被量为1.5×10‑6ug/孔，待检血清阴阳性临界稀释浓度为1:100，酶标二抗最佳稀释浓度为1:80000；包被液为碳酸盐缓冲液，血清和二抗稀释液均为PBST溶液，封闭液为2％BSA溶液；阴阳性临界值为0.25。通过对临床血清检测表明，批内及批间检测结果变异系数均小于10％；该方法具有良好的特异性；与ID‑Vet公司生产的cELISA试剂盒对306份血清比较检测，两者符合率为92.75％。PPRV H蛋白抗体iELISA检测方法可用于临床小反刍兽疫抗体检测，其操作比cELISA更为省时省力，简便快捷。