活细胞内同时可视化基因的DNA、mRNA和蛋白的标签及方法

摘要

本发明公开了一种用于活细胞内同时可视化基因的DNA、mRNA和蛋白的三重标签及方法。该标签包含12个TS1重复单元组成的CRISPR‑Tag DNA序列、12个MS2V5单元序列组成的MS2 DNA序列以及含有内含子的蓝色荧光蛋白序列。DNA序列长度短，能通过CRISPR‑Cas9介导的基因重组方式插入目标蛋白编码基因的N端或C端；制备方法先制备TriTag标签，构建可视化稳定细胞系，再构建目标内源基因可视化体系并转染分选，最后可实现活细胞动态成像。本发明的TriTag能够被标记，实现染色质的动态成像，能对内源特定靶基因的染色质动态和基因表达进行直观地可视化，有利于数据的整合和分析，帮助解析基因表达的动态调控机制。