一种激活内源性Ngn3和MAFA基因表达的方法

摘要

本发明公开了一种激活内源性Ngn3和MAFA基因表达的方法。本发明方法基于CRISPRa的SAM系统建立激活靶细胞中内源性Ngn3和/或MAFA基因表达。所述SAM系统包括靶向Ngn3和/或MAFA基因转录起始点上游‑400至+1bp位置的sgRNA；针对Ngn3的sgRNA的靶序列为SEQ ID No.2和/或SEQ ID No.3；针对MAFA的sgRNA的靶序列为SEQ ID No.6和/或SEQ ID No.10。本发明应用CRISPRa技术，通过染色质重塑，能高效地激活293T细胞的Ngn3和MAFA表达。本发明将对基因诱导PSCs定向分化为β细胞以及胰腺的胚胎发育研究具重要作用。