重组减毒鼠伤寒沙门氏菌pcDNA3.3c-Caspase-3-Gala-VNP20009的构建方法及功能验证方法

摘要

本发明公开了Caspase‑3重组单链抗体的构建及功能验证的方法：包括以下步骤(1)构建pcDNA3.3c‑Caspase‑3‑Gala重组质粒；(2)构建pcDNA3.3c‑Caspase‑3‑Gala减毒鼠伤寒沙门氏菌VNP20009重组菌株；(3)Caspase‑3重组质粒通过减毒鼠伤寒沙门氏菌VNP20009胞内侵袭的特性,侵入细胞后实现蛋白Caspase‑3的真核表达，验证这种蛋白对细胞的杀伤作用。本发明中采用减毒鼠伤寒沙门氏菌VNP20009的胞内侵袭的特性实现人源毒素蛋白的表达，同时大量研究表明减毒鼠伤寒沙门氏菌VNP20009能够特异性聚集在实体肿瘤中，可以实现特异性杀伤肿瘤细胞的目的，为肿瘤治疗研究提供实验依据。