一种表达瑞替普酶rPA的细胞株及方法

摘要

本发明属于生物制药领域，具体涉及一种人源细胞表达瑞替普酶的方法细胞株。该方法具体步骤为：基因合成含有分泌信号的编码瑞替普酶的cDNA序列并插入慢病毒表达载体，构建可以分泌表达瑞替普酶的慢病毒载体，并包装慢病毒颗粒，然后以此慢病毒颗粒感染人源细胞293F，以慢病毒载体内携带的嘌呤霉素抗性筛选高拷贝、稳定表达瑞替普酶的单克隆细胞株，测试瑞替普酶表达含量及酶活性，验证建立的表达方法。本发明的优势在于：本方法建立的瑞替普酶表达细胞株是人源293F细胞，不含有致热源内毒素；并且表达细胞株是悬浮、稳定表达瑞替普酶，易于规模化放大，同时是分泌表达瑞替普酶，杂质少，易于纯化。