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一种采用大肠杆菌表达串联序列制备GLP-1或其类似物多肽的方法

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本发明公开一种采用大肠杆菌表达串联序列制备GLP‑1或其类似物多肽的方法，本发明设计的GLP‑1或其类似物的重组串联蛋白通式为：X‑(Y‑Z)n。其中：X为前导肽，Y为胰蛋白酶和CPB酶双酶切位点或Kex2酶和CPB酶双酶切位点及辅助序列，Z为GLP‑1或其类似物。n为串联重复数。通过大肠杆菌原核表达体系进行发酵诱导表达GLP‑1或其类似物的重组串联蛋白形成的包涵体无需变性剂即可完全溶解，溶解液经胰蛋白酶和CPB酶双酶切或Kex2酶和CPB酶双酶切获得GLP‑1或其类似物。本方法获得的GLP‑1或其类似物表达量高，酶切后GLP‑1目的蛋白收率及酶切后纯度高。

著录项

公开/公告号CN111072783B

专利类型发明专利
公开/公告日2021-09-28

原文格式PDF
申请/专利权人万新医药科技(苏州)有限公司;江苏万邦医药科技有限公司;
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申请/专利号CN201911373533.3
发明设计人辛中帅;赵珊珊;文良柱;平康康;徐晓峰;李夷平;
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申请日2019-12-27
分类号C07K19/00(20060101);C07K14/605(20060101);C12N15/62(20060101);C12N15/70(20060101);C12N1/21(20060101);C12R1/19(20060101);
代理机构32218 南京天华专利代理有限责任公司;
代理人杜静;张磊
地址 215123 江苏省苏州市苏州工业园区星湖街218号生物纳米园A4-213单元
入库时间 2022-08-23 12:32:58

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1. 一种采用大肠杆菌表达串联序列制备GLP-1或其类似物多肽的方法 [P] . 中国专利： CN111072783B . 2021.09.28
2. 一种采用大肠杆菌表达串联序列制备GLP-1或其类似物多肽的方法 [P] . 中国专利： CN111072783A . 2020-04-28
3. isolated and homologous long tensin (pten-long) human phosphatase polypeptide, pharmaceutical composition, method for treating a solid tumor in an individual, method for inhibiting growth of a solid tumor in an individual, method for inhibiting angiogenesis in a solid tumor in an individual, method for inducing apoptosis of a blood vessel epithelial vascular cell in a solid tumor in an individual, method for treating a solid tumor in an individual, human phosphatase polypeptide and long (pten-long) homologue, pten-long or a fragment enhanced analog thereof, composition, isolated nucleic acid encoding a long (pten-long) homologous human phosphatase polypeptide, expression vector, transformed cell capable of expressing tensin homologous human phosphatase polypeptide long (pten-long), host cell capable of expressing human phosphatase polypeptide and long tensin humolog en-long), process, isolated nucleic acid molecule, isolated antibody, antibody fragment and peptide fragment of sequence [P] . BRPI1005951A2 . 2016-10-11

机译：分离且同源的长肌腱（pten-long）人磷酸酶多肽，药物组合物，个体中治疗实体瘤的方法，个体中抑制实体瘤生长的方法，个体中抑制实体瘤中血管生成的方法，在个体的实体瘤中诱导血管上皮血管细胞凋亡的方法，在个体中治疗实体瘤的方法，人磷酸酶多肽和长（pten-long）同源物，pten-long或片段增强类似物及其组成，组成，编码长（pten-long）同源人磷酸酶多肽的分离核酸，表达载体，能够长表达tensin同源人磷酸酶多肽的转化细胞（pten-long），能够表达人磷酸酶多肽的宿主细胞和长tensin humolog en-long），方法，分离的核酸分子，分离的抗体，序列的抗体片段和肽片段
4. A gene therapy DNA vector based on the VTvaf17 gene therapy DNA vector carrying a target gene selected from the group of BDNF, VEGFA, BFGF, NGF, GDNF, NT3, CNTF, IGF1 genes to increase the expression level of these target genes, a method for its preparation and use, Escherichia coli strain SCS110-AF / VTvaf17-BDNF, or Escherichia coli SCS110-AF / VTvaf17-VEGFA, or Escherichia coli SCS110-AF / VTvaf17-BFGF, or Escherichia coli SCS110-AF / VTvaf17-NGF, or Escherichia / VTvaf17-GDNF, or Escherichia coli SCS110-AF / VTvaf17-NT3, or Escherichia coli SCS110-AF / VTvaf17-CNTF, or Escherichia coli SCS110-AF / VTvaf17-IGF1, carrying a gene therapy DNA vector, method for its production, production method commercially available gene therapy DNA vector [P] . 俄罗斯专利： RU2018145693A . 2020-06-25

机译：一种基于VTvaf17基因治疗DNA载体的基因治疗DNA载体，该载体带有选自BDNF，VEGFA，BFGF，NGF，GDNF，NT3，CNTF，IGF1基因的靶基因，以增加这些靶基因的表达水平，一种方法就其制备和使用而言，大肠杆菌菌株SCS110-AF / VTvaf17-BDNF或大肠杆菌SCS110-AF / VTvaf17-VEGFA或大肠杆菌SCS110-AF / VTvaf17-BFGF或大肠杆菌SCS110-AF / VTvaf17-NGF，或带有基因治疗DNA载体的大肠杆菌SCS110-AF / VTvaf17-CNTF或大肠杆菌SCS110-AF / VTvaf17-CNTF或大肠杆菌SCS110-AF / VTvaf17-IGF1，或带有基因治疗DNA载体的大肠杆菌生产，生产方法市售基因治疗DNA载体
5. Isolated polypeptide or fragment thereof or their variant or a derivative thereof, isolated nucleic acid sequence, process for obtaining nucleotide sequence homologues, expression vector, host cell, process for preparing a recombinant polypeptide, antibody or a fragment thereof, detection method of N. MENINGITIDIS, diagnostic method of N. MENINGITIDIS infection, use of the polypeptide, use of the nucleic acid sequence, use of oligonucleotide primers, use of the antibody, use of a pharmaceutically effective amount of the polypeptide and the antibody, a pharmaceutical preparation, prevention or treatment method of the N. MENINGITIDIS infection, identification method of the polypeptide immunoreactive fragment. [P] . CZ20002172A3 . 2000-11-15

机译：分离的多肽或其片段或其变体或衍生物，分离的核酸序列，获得核苷酸序列同源物的方法，表达载体，宿主细胞，重组多肽，抗体或其片段的制备方法，猪新孢子虫的检测方法，N。MENINGITIDIS感染的诊断方法，多肽的使用，核酸序列的使用，寡核苷酸引物的使用，抗体的使用，药学有效量的多肽和抗体的使用，药物制剂，预防或N.MENINGITIDIS感染的治疗方法，多肽免疫反应性片段的鉴定方法。