一种TALEN表达载体及其快速制备方法及靶基因和细胞双标记系统和应用

摘要

本发明公开了一种TALEN表达载体及其快速制备方法及靶基因和细胞双标记系统和应用。本发明可在一天内制备出结合任何18bp靶点的TALEN表达载体比CRISPR更快。本发明由一组线性单体、TALEN骨架质粒，并采用全新流程来组装TALEN。本发明可轻松高效地获得即用型TALEN，通过制备五对TALEN并在三种不同细胞系中编辑NF‑κB家族基因，证明了本发明制备的TALEN表达载体具有高效性、可重复行、可靠性及适用性。本发明的TALEN具有比CRISPR更高的编辑效率。此外，本发明还公开了一种通过同源定向修复对目标蛋白质和细胞同步标记的双标记系统，在基因编辑及生物技术领域具有广泛应用价值。