一种羊膜上皮干细胞诱导分化为功能性肝细胞的方法及其应用

摘要

本发明公布了一种利用人羊膜上皮干细胞诱导分化为具有生物功能的肝脏细胞的方法，包括以下步骤：1)羊膜上皮干细胞的分离、培养、扩增、鉴定及GFP(Green Fluorescent Protein)标志；2)体外诱导分化：实验用带有GFP标志的第3～7代羊膜上皮细胞干细胞，选择用含诱导培养基Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的体系1或者采用含诱导培养基Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ的体系2进行诱导分化。经体系1(诱导时间为14‑15天)或体系2(诱导时间为22‑23天)诱导分化得到能够表达肝脏细胞特异性标志物及具有正常肝脏细胞功能的肝脏细胞样细胞；3)体内移植：将诱导产生的肝脏样细胞移植到急性肝损伤模型小鼠体内，可明显缓解急性肝损伤、恢复小鼠肝脏功能及提高小鼠存活率。