一种快速分离培养人气道上皮细胞的方法及优化培养基

摘要

本发明公开一种快速分离培养人气道上皮细胞的方法及优化培养基，该优化培养基包括DMEM培养基、F‑12Nutirient Mix培养基、0.5mg/ml的氢化可的松、胎牛血清、25ug/ml的表皮生长因子、5mg/ml的胰岛素、11.7uM的霍乱毒素、10mM的ROCK1抑制剂、10mM的BMP4拮抗剂。本发明利用优化的培养基培养人气道上皮细胞的方法，不仅大大的简化了需要3T3 J2细胞为饲养层而培养上皮细胞的步骤，只需要将链霉蛋白酶消化的原代人气道上皮细胞培养于本发明优化的培养基中，且获得了快速分离且无限传代培养的人气道上皮细胞，将传代培养的人气道上皮细胞进行体外扩增培养，达到20代以上，即可获得足够量的种子细胞用于如体外细胞互作模型研究等诸多后续的体内外研究中。