大菱鲆生精上皮不同发育时期生殖细胞及体细胞的标记方法及应用

摘要

本发明公开了大菱鲆生精上皮不同发育时期生殖细胞及体细胞的标记方法及应用，从大菱鲆精巢cDNA中扩增Amh/Sox9/Gsdf片段，经克隆并择优后提取质粒，以限制性内切酶线性化质粒，回收质粒后制备探针，将样品处理后进行固定、脱水、包埋，切片后进行荧光原位杂交，最后进行细胞核染色，封片后观察拍照。有益效果为：本发明方法巧妙地将大菱鲆几个关键发育时期的精细胞及Sertoli细胞区分开，标记方法简单易行，精确度较高；大菱鲆生精上皮不同发育时期生殖细胞及体细胞的标记方法可以应用于其他海洋生物的生精上皮细胞区分及标记，为今后鱼类的精子发生及生精上皮内环境研究提供有效方法和科学依据。