基于IS26插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法

摘要

本发明公开了一种基于IS26插入序列构建能表达荧光的自杀型质粒及菌株的方法。该自杀型质粒的构建方法如下：通过AflII和XhoI双酶切pUC26‑tpm质粒和pUC26‑RP4质粒，然后将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建p26‑RP4质粒；然后通过EcoRI和Spel双酶切p26‑RP4质粒和pBBR1MCS4‑LuxCDAB质粒，再将电泳后回收的产物用连接酶连接，构建能表达荧光的自杀型质粒。将本发明中获得的自杀型质粒转化大肠杆菌WM3064感受态细胞，得到荧光标记的大肠杆菌；最后将其与目标菌株共培养，可构建荧光菌株。本发明方法效率高，可用于构建耐药菌株、药动药效学评价或筛选药物中。