用于PCR扩增的引物、试剂盒、检测MSI状态的方法及应用

摘要

本发明提供了一种用于PCR扩增的引物、试剂盒、检测MSI状态的方法及应用。该引物包括目标序列扩增区域和设置在目标序列扩增区域3’末端的封闭区域，封闭区域具有R(D)n1DsDsDx或R(D)n2DsDsMx所示结构，其中，R表示RNA碱基，D表示互补配对碱基，M表示错配碱基，n1和n2表示括号中D碱基的个数，n1为1或2，n2为2，s表示相邻的两个核苷酸之间的3’氧原子进行硫代修饰，x表示封闭修饰。最后三个碱基间的硫代连接防止末端带封闭修饰的碱基被酶切掉，故可采用高保真酶扩增，且既能保证扩增的准确性，又不产生非特异扩增和引物二聚体，从而提高了MSI状态检测的准确性。