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特异性示踪内皮细胞分化的hESC指示细胞系的构建方法

摘要

本发明公开了一种特异性示踪内皮细胞分化的hESC指示细胞系的构建方法,该方法包括如下步骤:(1)构建质粒CD144N‑GFP;(2)构建质粒TALENs,所述质粒TALENs包括质粒CD144N‑L2和质粒CD144N‑R2;(3)将质粒CD144N‑GFP和质粒TALENs同时核转ESCs,经过G418筛选,挑取单克隆之后,利用跨5’同源臂引物F1/R1及跨3’同源臂引物F2/R2进行PCR初步鉴定,鉴定双侧阳性者进行Southern blot鉴定,利用Kpn I酶切,长同源臂上探针进行杂交鉴定,阳性者即为特异性示踪内皮细胞分化的hESC指示细胞系。

著录项

  • 公开/公告号CN107805627B

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2020-11-06

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 中南大学;

    申请/专利号CN201710894222.6

  • 发明设计人 梁德生;胡志青;邬玲仟;

    申请日2017-09-28

  • 分类号C12N5/10(20060101);C12N15/63(20060101);

  • 代理机构43113 长沙正奇专利事务所有限责任公司;

  • 代理人卢宏;周栋

  • 地址 410083 湖南省长沙市岳麓区麓山南路932号

  • 入库时间 2022-08-23 11:11:03

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