一种通用型磺基转移酶活性分析方法

摘要

本发明公开了一种通用型磺基转移酶活性分析方法，该方法将3’‑磷酸腺苷‑5’‑磷酰硫酸(PAPS)、磺基转移酶及磺基转移酶特异性底物混合发生磺酸化反应，生成3’‑磷酸腺苷‑5’‑磷酸盐，IMPAD1酶能特异性水解3’‑磷酸腺苷‑5’‑磷酸盐释放磷酸根(Pi)，经由与Pi具有高结合能力的金属离子(Mⁿ⁺)和特定荧光探针(FP)组成的混合体系对Pi进行荧光定量检测，即可实现磺基转移酶活性的定量分析。该体系中，Mⁿ⁺与FP的结合将导致体系荧光被有效猝灭，而反应过程产生的Pi将有效掩蔽Mⁿ⁺从而使FP的荧光信号恢复。因此，通过监测体系中荧光信号的变化情况，即可实现磺基转移酶活性的荧光增强式传感。该方法普遍适用于所有以PAPS为磺酸基团供体的磺基转移酶活性的检测。