一种牛干扰素α生物学活性检测方法

摘要

本发明公开了一种牛干扰素α生物学活性检测方法及其应用。该方法包括以下步骤：采用PCR扩增获取牛Mx蛋白的Mxp的基因片段；去除pEGFP‑N1载体质粒的pCMV；用PCR扩增获得的牛Mx蛋白的Mxp的基因片段通过T4DNA连接酶替换原pEGFP‑N1载体质粒中的pCMV，构建pEGFP‑N1‑Mxp质粒；用pEGFP‑N1‑Mxp质粒转染细胞，并通过新霉素筛选出稳定转染细胞株；对筛选出的稳定转染细胞株进行克隆化培养，加入牛干扰素α与克隆化培养后的稳定转染细胞株共孵育，会激活Mx基因启动子活性促进细胞内EGFP的表达，通过激发光源照射后细胞发出荧光的强度与牛干扰素α的生物学活性呈正相关，因此可以定量评价牛干扰素α的生物学活性。