一种改造芽孢杆菌基因组的方法

摘要

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种改造芽孢杆菌基因组的方法。本发明具有适应性广(质粒转化难度低，pBTS质粒可以在多种革兰氏阳性菌中进行复制，改造多种菌的基因组)，可以反复多次改造同一菌株(重组质粒具有两个同源重组片段，依次发生两次同源重组，第二次同源重组后可能恢复到野生型，也可以得到改造菌株，但是不残留任何影响继续改造的片段，如抗性标记、质粒复制元件等)，并且可以改造对细菌生长影响较大的基因(引入cre重组酶和第二种抗性标记系统，可依靠抗性筛选第二次重组得到的改造菌株，杀死生存能力强的野生型菌株，之后表达cre重组酶，切割掉第二种抗性标记，残留的片段不会影响再次对菌株进行改造)。