一种提高α-L-鼠李糖苷酶r-Rha1热稳定性的方法

摘要

本发明公开了一种提高α‑L‑鼠李糖苷酶r‑Rha1热稳定性的方法。以原始型α‑L‑鼠李糖苷酶r‑Rha1（WT）基因为模板，采用易错PCR方法进行随机突变，构建该酶的突变文库，并建立了96孔板诱导表达及高通量筛选方法，最终获得了热稳定性提高的突变体。V529A突变体对试验使用的金属离子及效应物都具有与WT同样的耐受性。该突变体V529A具有优良的酶学性质，同时本发明也成功地构建了含上述突变体V529A的重组载体，实现了异源表达，为该酶的工业化生产和应用提供了良好的基础。