一种外源基因敲入乳酸乳球菌快速筛选系统及其构建方法和应用

摘要

本发明提供了一种外源基因敲入乳酸乳球菌的快速筛选系统，所述筛选系统包括温敏质粒和乳酸乳球菌；其中，所述温敏质粒包含his基因片段和温敏复制子‑红霉素抗性基因(Ts‑Em^r)片段；所述乳酸乳球菌的染色体上包含lacZ基因表达片段。当外源基因成功敲入时会导致乳酸乳球菌的lacZ基因不能表达，因而在含有X‑Gal的固体培养基上显示白色菌落，否则显示为蓝色，这种蓝‑白色的变化，可以在固体培养基上直观地观察到，因此大大减少筛选的工作量和时间。