炭疽保护抗原的高水平组成性生产

摘要

本发明涉及使用补料分批培养在大肠杆菌中制备炭疽保护抗原蛋白的方法。该方法建立了在大肠杆菌中快速、有效、有成本效益和高水平生产炭疽保护抗原(PA)的组成型表达系统。该方法的步骤涉及用含PA基因的重组组成型表达质粒转化大肠杆菌DH 5α细胞以获得重组DH 5α细胞和通过裂解所述细胞、接着变性凝胶电泳及使用PA抗体的蛋白质印迹技术来测试PA的表达。接着发酵并收集高细胞密度的细胞。所述的细胞用6-8摩尔尿素溶解并离心分离。尿素变性的PA从上述上清液中分离、纯化并此后洗脱。